雙光束紫外可見分光光度計是由於分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光後,發生了電子能級躍遷而產生的吸收光譜。由於各種物質具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構,其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質就有其*的、固定的吸收光譜曲線,可根據吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量,這就是分光光度計定性和定量分析的基礎。
雙光束紫外可見分光光度計的使用注意事項:
(1)在開機前將樣品室內的幹燥劑取出,儀器自檢過程中禁止打開樣品室蓋。
(2)吸收池必須潔淨,並注意配對使用。量瓶、移液吸管均應校正、洗淨後使用。比色皿內溶液以皿高的2/3~4/5為宜,不可過滿以防液體溢出腐蝕儀器。測定時應保持比色皿清潔,池壁上液滴應用擦鏡紙擦幹,切勿用手捏透光麵。測定紫外波長時,需選用石英比色皿。吸收池放入樣品室時應注意方向相同。用後用溶劑或水衝洗幹淨,晾幹防塵保存。
(3)測試品標注測試物質以及配置濃度,且吸收度在0.3~0.7之間為宜。測試中,因采用測試品溶劑為空白對照:1cm石英吸收池,由儀器規定波長或者規定的吸收峰±2nm以內自動掃描測定,測吸收度以核對測試品吸收峰位置是否正確。
(4)選用儀器的狹縫寬度應小於供試品吸收帶的半寬度,否則測得的吸收度值會偏低,狹縫寬度的選擇應以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準,對於大部分被測品種,可以使用2nm縫寬。
(5)實驗結束後將比色皿中的溶液倒盡,然後用蒸餾水或有機溶劑衝洗比色皿至幹淨,倒立晾幹。關電源將幹燥劑放入樣品室內,蓋上防塵罩,做好使用登記。